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cDNA Library,Rat Smooth Muscle
品牌 Code No. 包装量 价格 说明书 数量
Takara 9546 5 μg 5,949 元
 
□ 浓度  
     200 μg/ml  
□ 贮存溶液  
     Tris-HCl (pH 8.0) 10 mM
     EDTA 1 mM
 
■ 制品说明
本系列制品是基于Gubler and Hoffman方法 (Gene (1983) 25:263-269), 由各种Poly(A)+ RNA制作的质粒DNA型cDNA文库。合成cDNA片段时,使用了含有限制酶Not I位点的Oligo (dT)18 Linker Primer和BamH I (Bgl II)-Sma I 接头,通过这两个限制酶位点,使cDNA片段定向克隆到载体中。克隆前,做了短片段的分离处理,300 bp以下的片段大部分被去除掉。初级文库构建完成后,采用了固体平板培养法,仅对初级文库进行一次扩增,然后使用质粒提取试剂盒,从扩增文库的菌体中提取质粒,调整得到扩增的质粒cDNA文库。使用这种方法得到的扩增文库,尽可能保持了各种cDNA片段的克隆在初级文库中所占的比例。
 
■ 保存
-20℃。
 
■ cDNA文库使用的载体和多克隆位点
本cDNA文库制品使用的载体为pAP3neo,含有SV40启动子,可以在哺乳动物重庆时时彩中进行表达。同时,该载体含有ssDNA生成的必要f1 ori、也含有便于RNA合成的T7及T3 RNA聚合酶启动子。
GenBank Accession No.AB003468
1. cDNA片段克隆在pAP3neo载体的Bgl II位点和Not I位点之间。
* 由于cDNA片段合成时,使用了BamH I (Bgl II)-Sma I接头,克隆后,载体的Bgl II 位点失效,不能再被Bgl II酶切开。
2. Xba I 位点受dam methylase的影响。
 
■ 用途
对未知或已知的cDNA进行PCR筛选。
 
pAP3neo载体结构图
 
制品名称 Code No. Primary library size*1
(Independent clone)
插入片段*2
平均长度(kb)
Rat Smooth Muscle 9546 6.5×106 1.0
*1 Primary Library size (Independent clone):初级文库库容(扩增前的总克隆数)。
*2 插入片段平均长度: 随机挑选15个单克隆的插入片段长度平均值。