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机构用户解决方案

pUC118 Hinc II/BAP
品牌 Code No. 包装量 价格 说明书 数量
Takara 3322 5 μg 446 元
 
□ 贮存溶液  
     Tris-HCl (pH 8.0) 10 mM
     EDTA 1 mM
 
■ 制品说明
pUC118 Hinc II/BAP 载体是由pUC118 DNA经其多克隆位点上的限制酶Hinc II 酶切后,用E.coli 来源的碱性磷酸酶 (BAP) 去磷酸化后得到的。这种经BAP处理过的载体可以防止自身环化,转化时可以降低含有空载体的转化重庆时时彩数量。这种载体使用前不需要任何处理,可直接用于克隆。
 
■ 保存
-20℃。
 
■ 制备
使用CsCl-EtBr密度梯度超离心法纯化的pUC118 DNA,经限制酶Hinc II 消化后,再使用E.coli来源的碱性磷酸酶 (BAP) 进行去磷酸化处理。
 
■ 链长
3,162 bp (Messing等构建方法的计算值)。
 
■ GenBank登录
Entry Name : CVU07649
Accession No. : U07649
 
■ 纯度
1. 用Agarose电泳,显示单一条带。
2. 使用T4 DNA Ligase对pUC118 Hinc II/BAP进行自身连接时的转化效率低于未切断pUC118 转化效率的1%以下。
3. 使用T4 Polynucleotide Kinase将pUC118 Hinc II/BAP的5’-OH末端磷酸化后,再使用T4 DNA Ligase进行自身连接,然后转化至E.coli JM109 Competent Cell (转化效率为: 1×107 Colonies/1 μg pUC118) 时,其转化效率在1×106 Colonies/1 μg DNA以上,此时在含有IPTG、X-Gal的蓝白筛选平板培养基上的白色菌落数在1%以下。
 
■ pUC118多克隆位点图
 
 
■ pUC118载体图谱
 
 
 

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